潔凈車(chē)間沉降菌檢測(cè)方式與標(biāo)準(zhǔn)

1、菌體：病菌培養(yǎng)后，由一個(gè)或好多個(gè)病菌滋長(zhǎng)而產(chǎn)生的一病菌集落，通稱(chēng)CFU。通常用數(shù)量提示。

2、檢測(cè)方法：地基沉降法，即利用當(dāng)然地基沉降基本原理互聯(lián)網(wǎng)在空氣中的微生物物體于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)48個(gè)小時(shí)以上培養(yǎng)，在適宜的前提下讓其滋長(zhǎng)到可以看到的菌體數(shù)，來(lái)鑒定清潔自然環(huán)境內(nèi)的活微生物菌種數(shù)，并借此來(lái)鑒定無(wú)塵室的潔凈度等級(jí)。

3、常用的儀器設(shè)備和武器裝備

1）髙壓消毒鍋：應(yīng)用時(shí)參考文檔GZ-ZL-SOP-066-00舉辦實(shí)際操作。

2）控溫培養(yǎng)箱：務(wù)必按時(shí)對(duì)培養(yǎng)箱的溫度表舉辦計(jì)量檢定。

3）培養(yǎng)皿：一樣通常接受中90mm×15mm硼氯化鎂夾層玻璃培養(yǎng)皿。應(yīng)用前將培養(yǎng)皿放置121℃濕熱滅菌20分鐘。

4、培養(yǎng)基：簡(jiǎn)單營(yíng)養(yǎng)成分瓊脂培養(yǎng)基。將培育基加溫融化，制冷至約45℃在無(wú)菌技術(shù)前提下將培養(yǎng)基引入培養(yǎng)皿，每皿約15m1。待瓊脂培育基凝結(jié)后，將培養(yǎng)基平皿放進(jìn)30～35℃控溫培養(yǎng)箱中培育數(shù)鐘頭，若培養(yǎng)基平皿上確實(shí)沒(méi)有菌體生長(zhǎng)發(fā)育，就可以供取樣用，制取好的培養(yǎng)基平皿應(yīng)在2～8℃的條件中儲(chǔ)放。

5、測(cè)試流程

1）取樣方法：將已制取好的培養(yǎng)皿置放在預(yù)先確定的抽樣點(diǎn)，開(kāi)啟培養(yǎng)皿蓋，使培育基外邊外露0.5鐘頭，再將培養(yǎng)皿蓋緊蓋后顛倒。

2）培養(yǎng)，時(shí)間不少于48鐘頭。每次培養(yǎng)基應(yīng)該有對(duì)比實(shí)驗(yàn)，查驗(yàn)培養(yǎng)基自身是不是環(huán)境污染，可每次選中3只培養(yǎng)皿作對(duì)比培養(yǎng)。

3）菌落計(jì)數(shù)：用人眼立即記數(shù)，隨后用5～10倍高倍放大鏡查驗(yàn)，有無(wú)忽略。若培養(yǎng)皿上面有2個(gè)或2個(gè)以上菌體重合，可辨別時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上的菌落計(jì)數(shù)。

6、重視事宜

1）檢測(cè)用品要做殺菌處理，以保證檢測(cè)的穩(wěn)定性、精確性。

2）接受一切對(duì)策避免人為因素對(duì)樣版的環(huán)境污染。

3）對(duì)培養(yǎng)基、培育標(biāo)準(zhǔn)以及他主要參數(shù)作詳盡的記錄。

4）因?yàn)椴【贩N繁多，差別甚大，記數(shù)時(shí)一樣平時(shí)用電子散射光于培養(yǎng)皿后面或正臉細(xì)心調(diào)查，不必漏計(jì)培養(yǎng)皿邊沿生長(zhǎng)發(fā)育的菌體，并須重視細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀的差別，必須時(shí)要高倍顯微鏡辨別。

5）取樣前要認(rèn)真仔細(xì)每一個(gè)培養(yǎng)皿的品質(zhì)，如發(fā)覺(jué)質(zhì)變、損壞或環(huán)境污染的應(yīng)去除。

7、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)

1）測(cè)試狀態(tài)

（1）沉降菌檢測(cè)前：被測(cè)試無(wú)塵室（區(qū)）的溫濕度記錄須抵達(dá)劃分的規(guī)定，負(fù)壓差、務(wù)必操縱在劃分值內(nèi)。被檢測(cè)無(wú)塵室（區(qū)）已消毒。

（2）測(cè)試狀態(tài)有靜止和信息二種，并在敘述中標(biāo)明測(cè)試狀態(tài)。

（3）檢測(cè)員工：檢測(cè)員工務(wù)必衣著相符合自然環(huán)境潔凈度等級(jí)級(jí)其他事兒服。靜態(tài)數(shù)據(jù)檢測(cè)時(shí)，房間內(nèi)檢測(cè)員工不可超過(guò)2自我個(gè)人。

2）檢測(cè)時(shí)間

（1）對(duì)單邊流，如100級(jí)凈化處理屋子里及層.流事兒臺(tái)，檢測(cè)應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件正常的運(yùn)作不少于10分鐘后最開(kāi)始。

（2）對(duì)非單方面流，如10000級(jí)、100000級(jí)以上的凈化處理屋子，檢測(cè)應(yīng)在空調(diào)凈化系統(tǒng)軟件正常的運(yùn)作不少于30分鐘最開(kāi)始。

8沉降菌記數(shù)

1）至少取樣點(diǎn)數(shù)量：可按表1明確。在滿足至少測(cè)等級(jí)的與此同時(shí)，還宜滿足至少培養(yǎng)皿數(shù)，見(jiàn)表2。

表1至少取樣點(diǎn)數(shù)量

總面積(m2)

潔凈度等級(jí)等級(jí)

2）取樣點(diǎn)的布署：事兒區(qū)測(cè)試用例部位距地0.8～1.5m上下（稍高于事人情世故）?？稍谥匾淦餮b備或重要事兒流動(dòng)性局限性處增加測(cè)量點(diǎn)，取樣點(diǎn)的布署應(yīng)爭(zhēng)取均值，阻攔取樣點(diǎn)在某部分地區(qū)過(guò)度集中化，某部分地區(qū)過(guò)度希罕。

3）記錄：檢測(cè)敘述中應(yīng)記錄屋子溫度、空氣濕度、壓力差、測(cè)試狀態(tài)及數(shù)據(jù)測(cè)試。

4）實(shí)際效果籌算：用記數(shù)方法得到每個(gè)培養(yǎng)皿的菌體數(shù)。均值菌體數(shù)的籌算見(jiàn)上式：m1m2……mn

均值菌體數(shù)m=n

式中：m為均值菌體數(shù)；m1為1號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；m2為2號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；mn為n號(hào)培養(yǎng)皿菌體數(shù)；n為培養(yǎng)皿數(shù)量。

5）實(shí)際效果鑒定：用均值菌體數(shù)分辨無(wú)塵室的空氣中的微生物菌種。

6）無(wú)塵室（區(qū)）內(nèi)的均值菌體數(shù)務(wù)必小于所選中的鑒定限度（見(jiàn)表3）。

表3

清潔等級(jí)

7）若某無(wú)塵室（區(qū)）的均值菌體數(shù)超越鑒定限度，則務(wù)必對(duì)于此事地區(qū)優(yōu)先消毒殺菌，隨后再次檢測(cè)2次，檢測(cè)實(shí)際效果務(wù)必及格。

關(guān)鍵論文參考文獻(xiàn)：我國(guó)限度GB/T16294-1996